凝膠過濾層析結合液相色譜-串聯質譜法測定血清中游離甲狀腺激素_SelectCore WAX 96孔板

2025-02-19

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應用領域臨床免疫學
樣品血清
項目游離甲狀腺激素
參考標準/文獻分析測試學報，第42 卷第 12 期 2023 年12 月

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產地蘇州

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摘要

分析測試學報，第42 卷第 12 期 2023 年12 月

摘要：

基于凝膠過濾層析（GFC）進行前處理，結合液相色譜-串聯質譜（LC-MS/MS）建立了血清中游離三碘甲腺原氨酸（FT3）和游離甲狀腺素（FT4）的高通量、高靈敏檢測新方法。選用Sephadex LH-20凝膠小柱對150 μL 血清樣本進行過濾分離，先用 Tris-HCl緩沖液（0. 1 mol/L，pH 7. 4）淋洗去除結合蛋白的甲狀腺激素，然后用甲醇對游離的甲狀腺激素進行洗脫，采用LC-MS/MS法進行檢測和定量，并進行方法學驗證。結果顯示： FT3和 FT4的線性相關系數（r 2 ）均不小于 0. 999 5，批內及批間相對標準偏差為 1. 8%~10%，準確度為 85. 4%~ 110%，基質效應為 85. 8%~114%，回收率為 85. 8%~107%。采用該方法與平衡透析法（ED）同時檢測了 95份血清樣本，使用IBM SPSS Statistics 26和MedCalc統計軟件（v. 20. 0. 0）對檢測結果進行配對t檢驗分析、PassingBablok 回歸分析和 Bland-Altman 一致性分析。結果表明，GFC/LC-MS/MS 與 ED/LC-MS/MS 法對血清中 FT3、 FT4的測定結果無統計學差異（P>0. 05）。所建立的方法快速、簡便，受干擾因素相對較少，便于臨床推廣，可為臨床實驗室游離甲狀腺激素的快速、高效、準確檢測提供參考方法，同時為其它游離激素的檢測提供了一種新的思路。

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