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淀粉含量的測定

2019.11.11

【原理】

淀粉是由葡萄糖殘基組成的多糖,在酸性條件下加熱使其水解成葡萄糖,然后在濃硫酸的作用下,使單糖脫水生成糠醛類化合物,利用苯酚或蒽酮試劑與糠醛化合物的顯色反應,即可進行比色測定。

【儀器與用具】

電子天平;容量瓶:100ml×4,50ml×2;漏斗;小試管若干支;電爐;刻度吸管0.5ml×1,2.0ml×3,5ml×4;分光光度計 ?;記號筆。

【試劑】

(1)濃硫酸(比重1.84);

(2)9.2mol/L HClO4;

(3)2%蒽酮試劑:同蒽酮法(或9%苯酚,同方法一);

(4)淀粉標準液:準確稱取100mg純淀粉,放入100ml容量瓶中,加60~70ml熱蒸餾水,放入沸水浴中煮沸0.5h,冷卻后加蒸餾水稀釋至刻度,則每ml含淀粉1mg,吸取此液5.0ml,加蒸餾水稀釋至50ml,即為每ml含淀粉100μg的標準液。

【方法】

1.標準曲線制作

取小試管11支從0~10編號,按表24-3加入溶液和蒸餾水。

以下步驟按苯酚法或蒽酮法均可,見方法一或方法二,繪制相應的標準曲線。

表24-3 各試管加入標準液和蒸餾水量

管 號

0

1~2

3~4

5~6

7~8

9~10

淀粉標準液(ml)

0

0.4

0.8

1.2

1.6

2.0

蒸 餾 水(ml)

2.0

1.6

1.2

0.8

0.4

0

淀粉含量(mg)

0

40

80

120

160

200

2.樣品提取

將提取可溶性糖以后的殘渣,移入50ml容量瓶中,加20ml熱蒸餾水,放入沸水浴中煮沸15min,再加入9.2mol/L高氯酸2ml提取15min,冷卻后,混勻,用濾紙過濾,并用蒸餾水定容(或以2500r/min離心10min)。

3.測定 可采用苯酚法或蒽酮顯色法測定。

按下式計算淀粉的含量。淀粉水解時,在單糖殘基上加了1分子 ?水,因而計算時所得的糖量乘以0.9才為扣除加入水量后的實際淀粉含量。

淀粉含量(%)=

式中 C-標準曲線查得的淀粉含量(μg);

V-提取液總量(ml);

a-顯色時取液量(ml);

W-樣品重(g)。

注:淀粉水解完全度試驗 樣品測定中可同時作1份用于淀粉水解完全度檢驗的樣品,在酸解過濾后,將其殘渣加上2ml水,攪拌均勻,吸2滴于白瓷盤上,加2滴I2-KI溶液,顯微鏡下觀察,若出現紫藍色顆粒,證明水解不完全,其正式測試樣品需再加高氯酸水解,直至不出現藍紫色為止。


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