DNA在復(fù)制的時候，在DNA解旋酶的作用下，雙鏈?zhǔn)紫冉忾_，形成了復(fù)制叉，而復(fù)制叉的形成則是由多種蛋白質(zhì)和酶參與的較復(fù)雜的復(fù)制過程

　　（1）單鏈DNA結(jié)合蛋白（single—stranded DNA binding protein,ssbDNA蛋白）

　　ssbDNA蛋白是較牢固結(jié)合在單鏈DNA上的蛋白質(zhì)。原核生物ssbDNA蛋白和DNA結(jié)合時表現(xiàn)出協(xié)同效應(yīng)：如果第一個ssbDNA蛋白結(jié)合到DNA上去能力為1，第二個的結(jié)合能力可高達(dá)103；真核生物細(xì)胞里的ssbDNA蛋白與單鏈DNA結(jié)合時則不表現(xiàn)上述效應(yīng)。ssbDNA蛋白作用是保證解旋酶解開的單鏈在復(fù)制完成前能保持單鏈結(jié)構(gòu)，以四聚體的形式存在于復(fù)制叉處，等待單鏈復(fù)制后才脫下來，重新循環(huán)。因此，ssbDNA蛋白僅保持單鏈的存在，是不起解旋作用。

　　（2）DNA解鏈酶（DNA helicase）

　　DNA解鏈酶可以通過水解ATP獲得能量以解開雙鏈DNA。這一種解鏈酶分解ATP的活性依賴于單鏈DNA的存在。若雙鏈DNA中有單鏈末端或切口，則DNA解鏈酶能首先結(jié)合在這一部分，然后逐步向雙鏈的方向移動。復(fù)制時，大部分DNA解旋酶沿滯后模板的5’—〉3’方向并隨著復(fù)制叉的前進(jìn)而移動，只有個別解旋酶（Rep蛋白）是沿著3’—〉5’方向移動。因而推測Rep蛋白和特定DNA解鏈酶是分別在DNA的兩條母鏈上協(xié)同作用以解開雙鏈DNA。

　　（3）DNA解鏈過程

　　DNA在復(fù)制前不僅為雙螺旋而且處于超螺旋狀態(tài)，而超螺旋狀態(tài)的存在為解鏈前的必須結(jié)構(gòu)狀態(tài)，參與解鏈的除解鏈酶外有一些特定蛋白質(zhì)，比如大腸桿菌中的Dna蛋白等。一旦DNA局部雙鏈被解開，就必須有ssbDNA蛋白以穩(wěn)定解開單鏈，保證此局部不會恢復(fù)為雙鏈。兩條單鏈DNA復(fù)制的引發(fā)過程是有所差異，可是不論是前導(dǎo)鏈還是后隨鏈，都需要一段RNA引物用于開始子鏈DNA合成。因此前導(dǎo)鏈和后隨鏈的差別在于前者從復(fù)制起始點(diǎn)開始按5’—3’持續(xù)的合成下去、不形成岡崎片段、后者則隨著復(fù)制叉的出現(xiàn)、不斷合成長約2—3kb的岡崎片段。