PCR反應溫度怎么設置
在pcr反應過程中,要使用三個不同的溫度變化,有變性,退火,擴增三個不同的反應階段,而這三個反應需要的最適溫度不同。具體設置如下:
1、變性反應溫度的設置
當溫度控制在90 °C以上時DNA會發生變性,雙鏈DNA解鏈成單鏈。
2、退火反應溫度的設置
當溫度下降到50 °C的時候,DNA復性,兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合。
3、擴增反應溫度的設置
當溫度上升到72 °C左右時延伸,DNA 聚合酶在此時有最大活性,能夠催化4 種脫氧核苷酸合成新的DNA鏈。
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