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PCR反應溫度怎么設置

2022.1.22

在pcr反應過程中,要使用三個不同的溫度變化,有變性,退火,擴增三個不同的反應階段,而這三個反應需要的最適溫度不同。具體設置如下:

1、變性反應溫度的設置

當溫度控制在90 °C以上時DNA會發生變性,雙鏈DNA解鏈成單鏈。

2、退火反應溫度的設置

當溫度下降到50 °C的時候,DNA復性,兩種引物通過堿基互補配對與兩條單鏈DNA結合。

3、擴增反應溫度的設置

當溫度上升到72 °C左右時延伸,DNA 聚合酶在此時有最大活性,能夠催化4 種脫氧核苷酸合成新的DNA鏈。


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