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感受態(tài)細(xì)菌轉(zhuǎn)化時(shí)需要多大的質(zhì)粒濃度

2023.8.28

100-500ng/uL。質(zhì)粒轉(zhuǎn)化不少于10的5次方，連接產(chǎn)物不少于10的6次方。

兩種質(zhì)粒是可以同時(shí)進(jìn)入同一個(gè)感受態(tài)細(xì)胞的，比如構(gòu)建腺病毒載體時(shí)。但是要求兩種質(zhì)粒進(jìn)入同一個(gè)感受態(tài)細(xì)胞，轉(zhuǎn)化效率非常低，一般需要電轉(zhuǎn)或者其他的特殊處理。增加收菌次數(shù)，相對(duì)提高了質(zhì)粒的量，這樣的話裂解液的量可以適當(dāng)增加；裂解要充分，變性和復(fù)性按說明應(yīng)該是不超過5分鐘，合理控制時(shí)間。


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