茚三酮法定性定量檢測絲氨酸介紹
隨著人們對絲氨酸生理作用的深入認識和醫藥保健事業的不斷發展，醫藥、食品、飼料等行業對絲氨酸的需求量正迅速擴大。雖然L-絲氨酸屬于非必需氨基酸，但它卻具有許多重要的生理功能及用途，在醫藥、食品、化妝品中均有較為廣泛的應用。因此，測定混合氨基酸中絲氨酸的含量對絲氨酸的開發利用具有重要意義。α－氨基酸與茚三酮在弱酸性溶液中共熱，反應后經失水脫羧生成氨基茚三酮，再與水合茚三酮反應生成紫紅色或藍色物質 。
脯氨酸等仲胺氨基酸與茚三酮反應生成黃色物質。絲氨酸和茚三酮在弱酸性條件下共熱可以生成紫紅色的縮合物質，且其顏色隨著絲氨酸的含量變化而有所不同為了快速簡便地檢測氨基酸水解液中絲氨酸的含量，有研究提出了一種基于氨基酸紙上層析的改進茚三酮顯色法，并將其應用于難以分離的氨基酸的檢測。首先，將茚三酮加入到展層劑中，再對氨基酸混合液進行層析。
在一定條件下將層析后的茚三酮與氨基酸進行顯色反應，根據不同顏色即可鑒別絲氨酸。然后，對不同劑量的絲氨酸標準液使用上述方法繪制絲氨酸標準液的吸光度－含量的標準曲線，用以計算氨基酸水解液絲氨酸的含量。結果表明：茚三酮法定性定量檢測絲氨酸的最佳實驗條件為溶液pH在4.5左右，顯色劑用量為每10mL展層劑中加入2.5mL0.1%茚三酮，并在105℃下加熱5min。
推薦
