標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)框架解析

技術(shù)模塊	核心要求	創(chuàng)新點(diǎn)
樣品采集	分裝雙份樣本，規(guī)范標(biāo)記編號(hào)	首創(chuàng)皮膚衍生物分類標(biāo)準(zhǔn)
DNA提取	6種提取方法選擇	明確磁珠法在微量檢材的應(yīng)用
檢測(cè)方法	4大類7種技術(shù)路徑	引入數(shù)字PCR定量標(biāo)準(zhǔn)

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關(guān)鍵操作要點(diǎn)

1. 樣品處理規(guī)范

標(biāo)準(zhǔn)創(chuàng)新性將野生動(dòng)物制品分為9大類：骨骼/牙齒（≥0.2g骨粉）、毛羽（≥1根）、皮張（≥1cm2）等，各類樣品前處理需注意：

• 骨組織需75%乙醇清洗2-3次后粉碎
• 干燥皮張需緩沖液浸泡去除表層
• 肌肉組織新鮮樣本可直接研磨

2. DNA質(zhì)量評(píng)估

采用四重驗(yàn)證機(jī)制：

1. 分光光度法（GB/T 34796）
2. 電泳法（附錄A）
3. qPCR檢測(cè)Ct值
4. 熒光計(jì)定量

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檢測(cè)方法對(duì)比

實(shí)驗(yàn)室實(shí)施建議

污染防控體系

• 分區(qū)管理：按LY/T 2501設(shè)置預(yù)處理區(qū)、提取區(qū)、擴(kuò)增區(qū)
• 過程監(jiān)控：每批次設(shè)置空白對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照
• 設(shè)備校驗(yàn)：PCR儀需定期溫度校準(zhǔn)

技術(shù)驗(yàn)證要點(diǎn)

1. 新引物需通過BOLD/GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)驗(yàn)證
2. 全基因組測(cè)序要求覆蓋度≥5X
3. 疑難樣本建議多基因聯(lián)合檢測(cè)

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標(biāo)準(zhǔn)演進(jìn)分析

相較于LY/T 2501-2015，本標(biāo)準(zhǔn)的三大突破：

• 新增數(shù)字PCR技術(shù)規(guī)范
• 細(xì)化皮膚衍生物取樣標(biāo)準(zhǔn)
• 明確序列一致性99%的判定閾值