ISO/TS 21569-4:2016
分子生物標志物分析的水平方法. 檢測轉基因生物和衍生產品的分析方法. 第4部分: 檢測P-nos和P-nos-nptII DNA序列的實時PCR篩選法

Horizontal methods for molecular biomarker analysis - Methods of analysis for the detection of genetically modified organisms and derived products - Part 4: Real-time PCR based screening methods for the detection of the P-nos and P-nos-nptII DNA sequences

標準號: ISO/TS 21569-4:2016
發布: 2016年
總頁數: 16頁
發布單位: 國際標準化組織
當前最新: ISO/TS 21569-4:2016

引用標準: ISO 16577:2016 ISO 21569:2005 ISO 21570:2005 ISO 21571:2005 ISO 24276:2006 ISO 5725-1 Technical Corrigendum 1:1998 ISO 5725-1:1994 ISO 5725-2 Technical Corrigendum 1:2002 ISO 5725-2:1994 ISO 5725-3 Technical Corrigendum 1:2001 ISO 5725-3:1994 ISO 5725-4:1994 ISO 5725-5 Technical Corrigendum 1:2005 ISO 5725-5:1998 ISO 5725-6 Technical Corrigendum 1:2001 ISO 5725-6:1994 ISO/IEC 17025:2005

適用范圍: 本文件規定了從根瘤農桿菌中檢測nos啟動子區域DNA序列（P-nos）的過程，以及從大腸桿菌K12的Tn5轉座子中檢測P-nos與新霉素磷酸轉移酶基因（nptII）之間的DNA過渡序列的過程。nos啟動子和P-nos-nptII結構常被發現于轉基因植物中。基于實時定量PCR的P-nos和P-nos-nptII特定方法可用于定性篩選目的。為了識別和定量特定的轉基因植物（事件），需要進行后續分析。所述方法適用于從糧食產品中提取的DNA的分析，也可能適合從飼料、種子等其他產品中提取的DNA的分析。使用這些方法需要從相關基質中提取足夠量的可擴增DNA。通過P-nos元素特異性方法擴增的DNA序列可以被檢測到含有自然發生的A. tumefaciens Ti質粒的DNA。因此，獲得陽性篩選結果后需要進一步確認。后續分析應采用構建體特定或事件特定的方法。

術語	描述
nos啟動子區域 P-nos promoter region	從根瘤農桿菌中檢測的DNA序列，常被發現于轉基因植物中。
nptII基因 neomycin-phosphotransferase gene	位于大腸桿菌K12的Tn5轉座子中的基因，常與P-nos序列一起用于轉基因植物檢測。

實時定量PCR設備適用于熒光分子激發和熒光信號檢測	用于DNA擴增和定量分析的關鍵設備，支持熒光檢測技術。