黃曲霉毒素M1&B1檢測
目前，關于乳品中黃曲霉毒素、食品中黃曲霉毒素的檢測，有很多標準，GB、SN,歸納起來，多數采用免疫親和柱凈化-HPLC法檢測，以及酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA試劑盒法)。
博納艾杰爾可以提供整體檢測所需關鍵產品：
類別 作用 名稱 規(guī)格
關鍵耗材 凈化 黃曲霉毒素總量免疫親和柱 25支/盒,1mL
關鍵耗材 凈化 黃曲霉毒素B1免疫親和柱 25支/盒,1mL
關鍵耗材 凈化 黃曲霉毒素M1免疫親和柱 25支/盒，1mL&3mL
關鍵耗材 凈化 Cleanert PEP 固相萃取柱 60mg/3mL
關鍵耗材 測定 Venusil MP C18 液相色譜柱 4.6*250mm,5um
關鍵耗材 測定 黃曲霉毒素ElISA 試劑盒 96孔/48孔
關鍵耗材 測定 黃曲霉毒素總量膠體金快速檢測卡 50條/盒
關鍵耗材 測定 黃曲霉毒素總量膠體金快速檢測卡 50條/盒
關鍵耗材 測定 Venusil MP C18 液相色譜柱 4.6*250mm,5um
試劑標品 測定 黃曲霉毒素混標液體(B1、B2、G1、G2) B1 1ug/ml;B2 3ug/ml;
G1 1ug/ml; G2 3ug/ml
試劑標品 測定 黃曲霉毒素B1標準品 1mg
試劑標品 測定 乙腈，HPLC級溶劑 瓶/4L
特殊器材 測定 黃曲霉素光化學柱后衍生反應池 臺
儀器 測定 島津10AVP PIUS HPLC 單泵、單檢測器、工作站 帶熒光檢測器
儀器 測定 微孔板酶標儀 450nm/630nm
儀器 測定 柱溫箱 臺
常用檢測方法對比：
1 免疫親和柱-熒光分光光度法和免疫親和術-HPLC法
黃曲霉毒素免疫親和柱-高效液相色譜法比傳統(tǒng)的HPLC法更加安全,可靠,靈敏度和準確度高.它采用單克隆抗體免疫技術,可以特效性地將黃曲霉毒素或其他真菌毒素分離出來,分離效率和回收率高，是一種準確定性定量的首選方法。
分析原理試樣中的黃曲霉毒素用一定比例的甲醇/水提取液經過過濾,稀釋后,用免疫親和柱凈化,以甲醇將親和柱上的黃曲霉毒素淋洗下來,在淋洗液中加入溴溶液衍生,以提高測定靈敏度,然后將甲醇-黃曲霉毒素淋洗液的一部分注入HPLC中,對黃曲霉毒素B1,B2,G1,B2分別進行定量分析.免疫親和柱是用大劑量的黃曲霉毒素單克隆抗體固化在水不溶性的載體上,然后裝柱而成.該方法的測定范圍0-300ug/kg.
參考案例：中草藥酸棗仁中黃曲霉毒素的檢測
2 酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)
原理:將已知抗原吸附在固態(tài)載體表面,洗除末吸附抗原,加入一定量抗體與待測樣品(含有抗原)提取液的混合液,競爭培養(yǎng)后,在固相載體表面形成抗原抗體復合物.洗除多余抗體成分,然后加入酶標記的抗球蛋白的第二抗體結合物,與吸附在固體表面的抗原抗體結合物相結合,再加入酶底物.在酶的催化作用下,底物發(fā)生降解反應,產生有色物質,通過酶標檢測儀測出酶底物的降解量,從而推知被測樣品中的抗原量.
ELISA方法通常用于大規(guī)模的篩選，由于其高同量的特點，是一種性價比很高的測試方法。
3一步式黃曲霉毒素檢測膠體金試紙法
一步式黃曲霉毒素檢測膠體金試紙法是利用單克隆抗體而設計的固相免疫分析法.由此產生的一步式黃曲霉毒素快速檢測試紙可在5—10分鐘完成對樣品中黃曲霉毒素的定性測定.借助黃曲霉毒素標準樣品,這種方法能估算黃曲霉毒素的含量,非常適用于現場測試和進行大量樣品的初選.
【背景知識】
黃曲霉毒素被世界衛(wèi)生組織(WHO)的癌癥研究機構劃定為1類致癌物,是一種毒性極強的劇毒物質.黃曲霉毒素的危害性在于對人及動物肝臟組織有破壞作用,嚴重時,可導致肝癌甚至死亡.在天然污染的食品中以黃曲霉毒素B1最為多見,其毒性和致癌性也最強.
黃曲霉毒素(AFT)是一類化學結構類似的化合物，均為二氫呋喃香豆素的衍生物。黃曲霉毒素是主要由黃曲霉 (aspergillus flavus) 寄生曲霉 (a.parasiticus) 產生的次生代謝產物，在濕熱地區(qū)食品和飼料中出現黃曲霉毒素的機率最高。B1是最危險的致癌物，經常在玉米，花生，棉花種子，一些干果中常能檢測到。它們在紫外線照射下能產生熒光，根據熒光顏色不同，將其分為B族和G族兩大類及其衍生物。AFT目前已發(fā)現20余種。AFT主要污染糧油食品、動植物食品等;如花生、玉米，大米、小麥、豆類、堅果類、肉類、乳及乳制品、水產品等均有黃曲霉毒素污染。其中以花生和玉米污染最嚴重。家庭自制發(fā)酵食品也能檢出黃曲霉毒素，尤其是高溫高濕地區(qū)的糧油及制品種撿出率更高。
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技術原理
