茚三酮顯色法測定殼聚糖含量介紹
殼聚糖是甲殼素的脫乙酰基衍生物，是一種分子量較大的堿性多糖。由于分子間和分子內強烈的氫鍵作用，殼聚糖在水及大多數溶劑中的溶解性較差，可溶于醋酸等無機酸的稀溶液中。殼聚糖及其衍生物具有較強的生物活性，具有抗腫瘤、抗凝血、抗血栓、降血脂和增強免疫力等功能。殼聚糖還具有良好的生物降解性和生物相容性，被廣泛應用于生物醫學、環境科學、食品等領域。隨著殼聚糖產品的大量開發及上市，對其進行含量測定也逐漸受到了重視。
有研究根據殼聚糖與茚三酮作用形成的復合物在570nm 處有特征吸收的特性，建立了利用分光光度法測定殼聚糖含量的方法。該測定方法的適宜條件為：在pH5. 5 的HAc-NaAc 緩沖體系中，當緩沖溶液用量為2. 00mL、茚三酮( 濃度為10. 00g/L ) 用量為1. 00mL、加熱煮沸20min 時，顯色效果最好。?
在0. 004～0. 04 g/L 濃度范圍內，殼聚糖濃度與其吸光度值線性關系良好，所得標準曲線方程為：y = 23. 942x + 0. 1423，相關系數r2 =0. 9981。穩定性、重現性和回收率實驗結果表明，該顯色方法在2h 內穩定性良好，精密度可靠。?
實驗中發現，殼聚糖與茚三酮作用顯色后，除了在570nm 處有顯著的紫外吸收外，在408nm 處也有一明顯吸收，并且與殼聚糖的濃度具有較好的線性相關性。估計是由于顯色過程中改變了殼聚糖結構所致，在今后的研究中可予以關注。實驗結果表明，利用茚三酮顯色法測定殼聚糖含量的實驗方法操作簡單，反應條件也比較容易控制，且重現性好，適用于樣品中微量殼聚糖的檢測。
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